Deksametazonun primer osteoblast apopitozundaki rolü: Hücresel ve moleküler mekanizmalar
Nirong Bao, Jianning Zhao, Yurong Wang, Sujia Wu, Xiaofeng Zeng, Junhua Wang
Department of Orthopaedics, Jinling Hospital, Nanjing, Jiangsu Province, China
Keywords: Apopitoz/ilaç etkisi; kemik yo¤unlu¤u/ilaç etkisi; kemik ili¤i hücresi/ilaç etkisi; glukokortikoid/yan etki; NFkappa B/metabolizma; fare; osteoblast/metabolizma/ilaç etkisi.
Abstract
Amaç: Glikokortikoidlerin osteoblast hücrelerinin canlı- lı¤ı üzerine etkisi incelendi ve osteoblast apopitozu sürecinde hücresel ve moleküler mekanizmalardaki rolü arafltı rıldı. Gereç ve yöntem: Deksametazon, yenido¤an farelerin kranyal kemiklerinden elde edilen primer kültürde üretilen osteoblast-benzeri hücrelerde apopitoz oluflturmak amacıyla kullanıldı. Osteoblastların canlı kalma ve apopitoz oranları, caspase-3 etkinli¤i ve nükleer faktör-kappa B’nin DNA ba¤lanma aktivitesi MTT-boya redüksiyonu mikrotesti, akım sitometrisi, kolorimetrik substrat testi ve elektroforetik mobilite flift testi ile ölçüldü. Deksametazonun hücrelere etkisindeki farklılıkları de¤erlendirmek amacıyla osteoblast ve fibroblastların canlı kalma oranları karflılafltırıldı.
Bulgular: Deksametazonun, yo¤unluk ve zamana ba¤lı olarak, apopitoz sürecinde osteoblast-benzeri hücrelerin canlı kalma oranını anlamlı derecede düflürdü¤ü, hücresel caspase-3 aktivasyonunu artırdı¤ı ve nükleer faktörkappa B etkinli¤ini baskıladı¤ı gözlendi (p<0.05). Buna karflın, deksametazonun fibroblastlarda apopitotik etki oluflturmadı¤ı görüldü.
Sonuç: Bulgularımız, deksametazonun caspase-3 üzerinden transforme olmamıfl primer osteoblast kültüründe apopitoza neden oldu¤unu, buna karflın nükleer faktörkappa B’nin caspase-3’ü baskılayarak bunu önleyebildi- ¤ini göstermektedir.